99590-86-0,EGTA Acetoxymethyl ester应存储于阴凉,干燥处
创始人
2025-12-09 17:23:43

化学性质:

溶解性:可溶于DMSO(20 mg/mL)、DMF。

密度:1.303。

沸点:664.2±55.0 °C(预测值)。

酸度系数(pKa):3.35±0.50(预测值)。

外观:无色至浅黄色粘稠液体。

基本参数:

CAS:99590-86-0

英文名:EGTA AM,EGTA Acetoxymethyl ester

分子式:C26H40N2O18

分子量:668.60

规格标准:1g、5g、10g

试剂厂家:陕西新研博美生物科技有限公司

结构式:

相关应用:

细胞内钙信号研究:

抑制钙振荡:50 μM EGTA AM可降低异步兴奋性突触后电流(aEPSC)至对照的58.9%。

缓冲胞质钙浓度:用于研究钙依赖性酶、通道蛋白等。

与其他技术的联用:

荧光探针校准:与MOPS-EGTA缓冲液配合,建立标准钙浓度曲线。

神经元研究:调节突触传递精度,降低动作电位抖动(如从±1.51 ms降至±1.08 ms)。

使用方法:

溶液配制:

储备液制备:EGTA AM需溶于无水DMSO或DMF,避免水解。建议浓度为2-5 mM。避光、密封分装,-20℃保存,有效期6-12个月。

工作液稀释:取2X工作液,与等体积细胞培养基混合,终浓度为2.5 μM EGTA AM、0.04% Pluronic F-127、1 mM丙磺舒。

细胞加载步骤:

细胞准备:将细胞接种于培养板,确保生长至70%-80%密度,弃去旧培养基。

染料加载:将EGTA AM工作液加入细胞中,37℃、5% CO?孵育20-120分钟。全程避光,避免DMSO或EGTA AM光降解。

去除未结合探针:孵育结束后,用含1 mM丙磺舒的缓冲液替换染料溶液,洗涤2-3次,去除表面残留探针。

作用机制:

EGTA AM是钙螯合剂EGTA的细胞膜渗透性衍生物。其结构核心是EGTA分子上的四个羧酸基团被乙酰氧基甲酯(AM)修饰,赋予其脂溶性,使其能够被动扩散穿过细胞膜。进入细胞后,AM基团被胞内酯酶水解,释放活性形式的EGTA,特异性螯合胞内钙离子。

膜渗透与水解:

被动扩散:EGTA AM的AM酯基团使其脂溶性增强,可自由穿过细胞膜进入胞质。

酯酶水解:胞内酯酶将AM基团水解,生成非脂溶性EGTA,滞留于细胞内,避免被排出。

钙离子螯合:

高选择性结合:EGTA对Ca2+的亲和力高于Mg2+,解离常数(Kd)分别为60.5 nM和1-10 mM,选择性达10?倍。

生理pH适应性:在生理pH(7.4)下,EGTA的表观pKa为6.91,确保其在细胞内稳定螯合Ca2?。

注意事项:

纯度标准95%+

保存建议:避免反复冻融,避光保存,储液应该立即使用,任何未用的溶液分装小份冷冻于 < -20

注意事项:仅用于科学研究

相关试剂(部分):

Carboxyl diazirine alkyne

L-Azidonorleucine hydrochloride

Cyclic AMP sodium

EGTA-AM

Fluorescein Diacetate

Fmoc-Arg(Pbf)-OH

Tri-GalNAc-DBCO

DBCO-PEG4-Biotin

N-Hydroxysuccinimide

4-Aminobenzaldehyde

UDP-GalNAz disodium

Rhodamine B isothiocyanate

4-Azido-L-phenylalanine

Palmitic acid sodium

5-Ethynyluridine

Tris(benzyltriazolylmethyl)amine

Ethylenediaminetetraacetic acid

上述信息均由陕西新研博美生物科技有限公司的小编 XYBMWD所整理

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