BHQ-2 acid(黑洞淬灭剂-2 羧酸) 是一种高效、非荧光的淬灭剂,广泛应用于分子生物学、生物技术及荧光分析领域。
一、化学结构与性质
- 分子结构:
- BHQ-2 acid 属于多环芳香族化合物,具有广谱光吸收特性。
- 其分子末端带有羧基(-COOH),增强了水溶性,并提供了化学偶联位点,便于与含氨基的分子(如寡核苷酸、肽、蛋白质)共价连接。
- 物理性质:
- 外观:深紫色固体。
- 溶解性:易溶于 DMSO、DMF、甲醇等有机溶剂,在缓冲液中适度溶解。
- 稳定性:在干燥、避光条件下稳定,可长期储存。水溶液中应尽快使用,以避免羧基水解或降解。
- 光学性质:
- 吸收波长:主要吸收 520–620 nm 波段的光,峰值吸收在 566 nm 左右。
- 荧光发射:几乎不发射可见光荧光,实现高效能量转移和荧光淬灭。
- 消光系数:高达 38,000 L·mol⁻¹·cm⁻¹,确保强吸收能力。
结构式:
BHQ-2 acid,BHQ-2酸,黑洞淬灭剂-2 羧酸
二、功能特性
- 高效荧光淬灭:
- BHQ-2 acid 可与多种绿色至红光荧光染料(如 FAM、TAMRA、Alexa Fluor 546、Cy3 等)形成 FRET(荧光共振能量转移)体系。
- 通过吸收激发能量并阻止荧光发射,实现探针信号控制,显著降低背景噪声,提高检测灵敏度。
- 化学可修饰性:
- 羧基末端可通过酰胺化或酯化与氨基化分子偶联,便于标记寡核苷酸、肽或蛋白。
- 缩合剂(如 EDC/NHS)可活化羧基,促进与生物分子的稳定连接。
- 水溶性与生物兼容性:
- 酸性形式增强了在水溶液中的溶解度,同时具有较低的免疫原性,适合体外和部分体内实验。
- 在缓冲液及温和生化条件下保持荧光淬灭能力和化学完整性。
- 宽光谱吸收与热稳定性:
- 覆盖绿色至橙红光谱(520–620 nm),避免多通道实验中的通道间干扰。
- 在常规实验温度范围内化学结构稳定,淬灭效率不受显著影响。
三、应用领域
- 分子探针设计:
- 常用于 TaqMan 探针、分子信使探针或荧光报告底物设计。
- 未结合靶标时,荧光被 BHQ-2 acid 淬灭;靶标结合或酶切后荧光恢复,实现显著信号变化。
- 酶活性检测与生物传感:
- 标记酶底物,通过荧光恢复定量分析酶动力学或蛋白相互作用。
- 构建 FRET 型传感器,检测蛋白质相互作用、小分子识别及细胞信号传导。
- 核酸检测与诊断:
- 用于实时定量 PCR 探针开发,通过淬灭荧光报告基团实现高灵敏度核酸检测。
- 在荧光原位杂交(FISH)中降低背景信号,提高特异性。
- 细胞成像与体内成像:
- 结合靶向分子后,构建低背景成像探针,适用于组织内复杂环境下的特异性成像。
- 推动生命科学研究向高分辨率和多参数分析方向发展。
- 纳米材料与荧光传感器构建:
- 通过共价偶联与纳米载体或荧光染料结合,构建高灵敏度的荧光传感器或靶向探针。
- 在药物筛选与高通量检测中,利用淬灭信号变化实现高灵敏度平台。
四、储存与使用注意事项
- 储存条件:-20℃ 下冷冻干燥、避光保存,可长期稳定。
- 使用注意事项:
- 避免反复冻融,以免影响羧基活性。
- 操作时避光,防止光降解。
- 偶联反应在中性或微碱性条件下进行(pH 6–7),以保证羧基活性和荧光淬灭功能。
- 反应后需纯化去除未反应的淬灭剂,避免干扰实验结果。
温馨提示:供应产品仅用于科研,不能用于人体!
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