连接反应中如何调整载体与片段的比例
创始人
2025-07-14 14:04:04
连接反应中如何调整载体与片段的比例
T载体应该很容易连接啊。连接体系要小,一般10ul足够了,再说你还是用的商业感受态。
还有你PCR产物是否检测过,用的是什么聚合酶,有的高保真聚合酶没有加A特性的。
PCR回收的产物浓度如何?跑出带太淡了,或者产物太大也会连不上。
最好告诉我你连的大小到底多少bp。

连接时间是否过短呢,回收的PCR产物是否质量过低。这些你都应该考虑。

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